ГОСТ 8808-2000 Масло кукурузное. Технические условия (с Поправкой)
ГОСТ 8808-2000 Масло кукурузное. Технические условия (с Поправкой)
ГОСТ 8808-2000
Группа Н62
МАСЛО КУКУРУЗНОЕ
Технические условия
Maize oil. Specifications
МКС 67.200.10
ОКП 91 4162
1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом жиров
ПРЕДСТАВЛЕН Межгосударственным Техническим комитетом по стандартизации МТК 238 «Масла растительные и продукты их переработки»
ВНЕСЕН Госстандартом России
2 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол N 18 от 18 октября 2000 г.)
За принятие проголосовали:
3 Постановлением Государственного комитета Российской Федерации по стандартизации и метрологии от 26 июля 2001 г. N 291-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 8808-2000 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 1 января 2002 г.
5 ПЕРЕИЗДАНИЕ
ВНЕСЕНА поправка, опубликованная в ИУС N 2, 2013 год
Поправка внесена изготовителем базы данных
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на рафинированное, нерафинированное кукурузное масло и устанавливает технические требования, методы контроля, требования к транспортированию и хранению.
Обязательные требования к качеству продукции, обеспечивающие ее безопасность для жизни и здоровья населения, изложены в 4.1.1-4.1.3, 4.2.1-4.2.3, 4.3.2-4.3.5.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ Р 51487-99 Масла растительные и жиры животные. Метод определения перекисного числа
ГОСТ Р 52110-2003 Масла растительные. Методы определения кислотного числа
ГОСТ Р 52676-2006 Масла растительные. Методы определения фосфорсодержащих веществ
ГОСТ Р 54896-2012 Масла растительные. Определение показателей качества и безопасности методом спектроскопии в ближней инфракрасной области
ГОСТ 745-79* Фольга алюминиевая для упаковки. Технические условия
______________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ 745-2003.
ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 3560-73 Лента стальная упаковочная. Технические условия
ГОСТ 4233-77 Натрий хлористый. Технические условия
ГОСТ 5037-97 Фляги металлические для молока и молочных продуктов. Технические условия
ГОСТ 5471-83* Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб
______________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 52062-2003.
ГОСТ 5472-50 Масла растительные. Определение запаха, цвета и прозрачности
ГОСТ 5475-69 Масла растительные. Методы определения йодного числа
ГОСТ 5476-80* Масла растительные. Методы определения кислотного числа
______________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 52110-2003.
ГОСТ 5477-93 Масла растительные. Методы определения цветности
ГОСТ 5479-64 Масла растительные и натуральные жирные кислоты. Метод определения неомыляемых веществ
ГОСТ 5480-59 Масла растительные и натуральные жирные кислоты. Методы определения мыла
ГОСТ 5481-89 Масла растительные. Методы определения нежировых примесей и отстоя
ГОСТ 5717-91* Банки стеклянные для консервов. Технические условия
______________
* На территории Российской Федерации действуют ГОСТ 5717.2-2003, ГОСТ 5717.1-2003.
ГОСТ 6038-79 
-глюкоза. Технические условия
ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ 7376-89* Картон гофрированный. Общие технические условия
______________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 52901-2007.
ГОСТ 7824-80* Масла растительные. Методы определения массовой доли фосфорсодержащих веществ
______________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 52676-2006.
ГОСТ 7933-89 Картон для потребительской тары. Общие технические условия
ГОСТ 9078-74 Поддоны плоские. Общие технические условия
ГОСТ 9218-86 Цистерны для пищевых жидкостей, устанавливаемые на автотранспортные средства. Общие технические условия
ГОСТ 9225-84* Молоко и молочные продукты. Методы микробиологического анализа
______________
* На территории Российской Федерации с 01.01.2011 г. действует ГОСТ Р 53430-2009.
ГОСТ 9287-59 Масла растительные. Метод определения температуры вспышки в закрытом тигле
ГОСТ 9347-74 Картон прокладочный и уплотнительные прокладки из него. Технические условия
ГОСТ 10117.1-2001 Бутылки стеклянные для пищевых жидкостей. Общие технические условия
ГОСТ 10117.2-2001 Бутылки стеклянные для пищевых жидкостей.Типы, параметры и основные размеры
ГОСТ 10354-82 Пленка полиэтиленовая. Технические условия
ГОСТ 10444.12-88 Продукты пищевые. Метод определения дрожжей и плесневых грибов
ГОСТ 10674-82* Вагоны-цистерны магистральных железных дорог колеи 1520 мм. Общие технические условия
_________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51659-2000.
ГОСТ 11354-93 Ящики из древесины и древесных материалов многооборотные для продукции пищевых отраслей промышленности и сельского хозяйства. Технические условия
ГОСТ 11812-66 Масла растительные. Методы определения влаги и летучих веществ
ГОСТ 13516-86 Ящики из гофрированного картона для консервов, пресервов и пищевых жидкостей. Технические условия
ГОСТ 13805-76 Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей. Технические условия
ГОСТ 13950-91 Бочки стальные сварные и закатные с гофрами на корпусе. Технические условия
ГОСТ 14192-96 Маркировка грузов
ГОСТ 15846-2002 Продукция, отправляемая в районы Крайнего Севера и приравненные к ним местности. Упаковка, маркировка, транспортирование и хранение
ГОСТ 16338-85 Полиэтилен низкого давления. Технические условия
ГОСТ 17133-85 Пластины резиновые для изделий, контактирующих с пищевыми продуктами. Технические условия
ГОСТ 17299-78 Спирт этиловый технический. Технические условия
ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия
ГОСТ 21650-76 Средства скрепления тарно-штучных грузов в транспортных пакетах. Общие требования
ГОСТ 22477-77 Средства крепления транспортных пакетов в крытых вагонах. Общие технические требования
ГОСТ 23285-78 Пакеты транспортные для пищевых продуктов и стеклянной тары. Технические условия
ГОСТ 24104-88* Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия
________________
* С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104-2001**.
** На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008.
ГОСТ 24597-81 Пакеты тарно-штучных грузов. Основные параметры и размеры
ГОСТ 24831-81 Тара-оборудование. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 25250-88 Пленка поливинилхлоридная для изготовления тары под пищевые продукты и лекарственные средства. Технические условия
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 25776-83 Продукция штучная и в потребительской таре. Упаковка групповая в термоусадочную пленку
ГОСТ 25951-83 Пленка полиэтиленовая термоусадочная. Технические условия
ГОСТ 26381-84 Поддоны плоские одноразового использования. Общие технические условия
ГОСТ 26593-85 Масла растительные. Метод определения перекисного числа
ГОСТ 26663-85 Пакеты транспортные. Формирование с применением средств пакетирования. Общие технические требования
ГОСТ 26668-85 Продукты пищевые и вкусовые. Методы отбора проб для микробиологических анализов
ГОСТ 26669-85 Продукты пищевые и вкусовые. Подготовка проб для микробиологических анализов
ГОСТ 26927-86 Сырье и продукты пищевые. Метод определения ртути
ГОСТ 26928-86 Продукты пищевые. Метод определения железа
ГОСТ 26929-94 Сырье и продукты пищевые. Подготовка проб. Минерализация для определения содержания токсичных элементов
ГОСТ 26930-86 Сырье и продукты пищевые. Метод определения мышьяка
ГОСТ 26931-86 Сырье и продукты пищевые. Методы определения меди
ГОСТ 26932-86 Сырье и продукты пищевые. Методы определения свинца
ГОСТ 26933-86 Сырье и продукты пищевые. Методы определения кадмия
ГОСТ 28178-89 Дрожжи кормовые. Методы испытаний
ГОСТ 29228-91 (ИСО 835-2-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 2. Пипетки градуированные без установленного времени ожидания
ГОСТ 30418-96 Масла растительные. Метод определения жирно-кислотного состава
ГОСТ 30711-2001 Продукты пищевые. Методы выявления и определения содержания афлатоксина В
и M
3 Классификация
3.1 Кукурузное масло в зависимости от способа обработки, показателей качества и назначения подразделяют на марки, указанные в таблице 1.
Таблица 1
4 Технические требования
Кукурузное масло вырабатывают в соответствии с требованиями настоящего стандарта по технологическим инструкциям или регламентам, утвержденным в установленном порядке.
4.1.1 Содержание пестицидов в рафинированном, дезодорированном масле марок Д и П не должно превышать нормативов, установленных органами здравоохранения для дезодорированных масел [1].
Содержание пестицидов в нерафинированном масле марки Р и рафинированном марки СК не должно превышать нормативов, установленных органами здравоохранения для недезодорированных масел [1].
4.1.2 Содержание токсичных элементов, микотоксинов, афлатоксина В, радионуклидов во всех марках кукурузного масла не должно превышать нормативов, установленных органами здравоохранения для растительных масел [1].
4.1.3 Микробиологические показатели в рафинированном дезодорированном кукурузном масле марки Д не должны превышать нормативов для масел для детского питания, установленных органами здравоохранения [2].
4.1.4 Показатели потребительской ценности (органолептические и физико-химические) должны соответствовать требованиям, указанным в таблицах 2 и 3.
4.1.5 Жирно-кислотный состав кукурузного масла приведен в приложении А.
4.1.6 Нормы для показателей «йодное число» и «массовая доля неомыляемых веществ» приведены в приложении Б.
Таблица 2
Таблица 3
O
0, не более4.2.1 Нерафинированное кукурузное масло марки Р должно вырабатываться из кукурузных зародышей, полученных в крахмалопаточном или мукомольно-крупяном производстве в соответствии [3].
Рафинированное дезодорированное масло марок П и Д и рафинированное недезодорированное марки СК должны вырабатываться из нерафинированного масла марки Р.
4.2.2 Содержание пестицидов в масле из кукурузного зародыша не должно превышать нормативов, установленных органами здравоохранения для недезодорированных масел [1].
4.2.3 Содержание токсичных элементов и афлатоксина В в масле из кукурузного зародыша не должно превышать нормативов, установленных органами здравоохранения для растительных масел [1].
4.2.4 При использовании в качестве сырья марок Р и СК для выработки кукурузного масла марок П и Д гигиенические требования к указанным маслам — по 4.1.1 и 4.1.2.
4.2.5 Для выработки рафинированного дезодорированного масла марки Д должно быть использовано нерафинированное масло с кислотным числом не более 5 мг KOH/г.
4.3.1 Кукурузное масло выпускают фасованным и нефасованным.
4.3.2 Рафинированное дезодорированное кукурузное масло фасуют:
— массой нетто 450, 500 и 700 г в стеклянные бутылки типов УП, IX, Х и XVI по ГОСТ 10117.1 и ГОСТ 10117.2;
— массой нетто 2000 г и 3000 г в стеклянные банки по ГОСТ 5717;
— массой нетто 1000 г в многослойные пакеты из комбинированного материала (полиэтилен, картон, фольга), разрешенного органами здравоохранения;
— массой нетто от 450 до 3000 г в бутылки и канистры из полимерных материалов.
Для упаковывания масла в полимерную тару используют следующие материалы:
— ПВХ — композиция по нормативному документу [4];
— композиция поливинилхлоридная для изготовления тары по нормативному документу [5];
— поливинилхлорид по ГОСТ 25250.
Допускается использовать при упаковывании кукурузного масла другие упаковочные материалы, в том числе полиэтилентерефталат или другие окрашенные (или неокрашенные) полимерные материалы, разрешенные органами здравоохранения для контакта с растительными маслами и обеспечивающие сохранность масла в таре при транспортировании и хранении.
Допустимые отклонения от массы нетто в граммах:
±5 — при фасовании от 450 до 750 включ.;
±10 » » св. 750 до 1000 включ.;
±20 » » св. 1000 до 2000 включ.;
±30 » » св. 2000 до 3000 включ.
Допустимые отклонения от вместимости до 3000 см
(включительно) — 1,5%.
4.3.3 Стеклянные бутылки с кукурузным маслом должны быть герметично укупорены капсулой из картона по ГОСТ 9347 или колпачком из алюминиевой фольги по ГОСТ 745 с картонной уплотнительной прокладкой с целлофановым покрытием для укупоривания бутылок с пищевыми жидкостями.
Картонные колпачки должны быть вместе с горлышком бутылки обтянуты плотно прилегающим целлулоидным или вискозным колпачком.
Бутылки из полимерных материалов с кукурузным маслом укупоривают колпачками из полиэтилена по ГОСТ 16338 (или они должны быть заварены).
4.3.4 Рафинированное дезодорированное кукурузное масло также разливают в алюминиевые фляги по ГОСТ 5037 с уплотнительными кольцами из жиростойкой резины по ГОСТ 17133 и других материалов, разрешенных органами здравоохранения.
По согласованию с потребителем не является браковочным фактором розлив рафинированного дезодорированного кукурузного масла в стальные бочки по ГОСТ 13950 вместимостью 100 и 200 дмнеоцинкованные или с покрытием внутренних поверхностей, разрешенным органами здравоохранения.
4.3.5 Стеклянные бутылки с кукурузным маслом упаковывают в деревянные многооборотные ящики по ГОСТ 11354 и пластмассовые многооборотные ящики для бутылок по нормативному документу [6].
4.3.6 Бутылки из полимерных материалов с кукурузным маслом упаковывают в ящики из гофрированного картона по ГОСТ 13516 или формируют для упаковки в термоусадочную пленку по ГОСТ 25951 на лотках или прокладках из гофрированного картона по ГОСТ 7376 или картона для потребительской тары по ГОСТ 7933. Групповую упаковку осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 25776.
4.3.7 Для местной реализации допускается упаковывать бутылки в проволочные многооборотные ящики по нормативному документу, а также в тару-оборудование по ГОСТ 24831.
4.3.8 Размеры лотков или прокладок из картона должны обеспечивать установку на них не менее 12 бутылок соответствующей вместимости.
Допускается групповая упаковка без прокладочных средств с установкой не менее 6 бутылок.
4.3.9 При необходимости продукцию, упакованную в термоусадочную пленку, формируют в пакеты на плоских поддонах по ГОСТ 9078 или ГОСТ 26381. Для скрепления упаковок в пакеты применяют полиэтиленовую пленку по ГОСТ 10354, стальную ленту по ГОСТ 3560, полипропиленовую ленту или растягивающуюся пленку по нормативному документу.
Пакетирование на поддонах должно производиться в соответствии с требованиями ГОСТ 24597, 22477, 23285.
При формировании транспортных пакетов с помощью термоусадочной пленки не допускается сварка ее с пленкой групповой упаковки.
4.3.10 Продукцию, упакованную в термоусадочную пленку, транспортируют и хранят при температурных условиях по ГОСТ 25776.
4.3.11 Тара, применяемая для розлива и хранения кукурузного масла, и транспортные средства (железнодорожные и автомобильные цистерны) должны быть тщательно пропарены, вымыты, высушены и не иметь посторонних запахов.
4.3.12 Кукурузное масло, предназначенное для районов Крайнего Севера и приравненных к ним местностей, должно упаковываться по ГОСТ 15846.
4.4.1 На каждую единицу потребительской тары с кукурузным маслом должна быть наклеена красочно оформленная этикетка, на которую наносят маркировку, содержащую:
— наименование продукта;
— вид, марку, назначение масла, а также сорт (при наличии сортовых розничных цен);
— наименование, местонахождение (адрес) изготовителя, упаковщика, экспортера, импортера, наименование страны и места происхождения;
— массу нетто или объем продукта;
— дату розлива (для продукта в потребительской таре);
— дату налива (для продукта в бочках, флягах, цистернах, баках, контейнерах);
— товарный знак изготовителя (при наличии);
— пищевую ценность: содержание жира в 100 г масла, энергетическая ценность в 100 г продукта — 899 ккал;
— срок годности;
— обозначение настоящего документа;
— информацию о сертификации (знак соответствия);
— гарантийный срок хранения.
Маркировку способом тиснения наносят непосредственно на бутылку из полимерных материалов.
Дату розлива и срок годности кукурузного масла проставляют компостером или штампом на этикетке, тиснением на колпачке или любым другим способом, обеспечивающим четкое ее обозначение, в том числе лазером.
4.4.2 На каждую транспортную упаковочную единицу или сгруппированный пакет с маслом дополнительно наносят маркировку, характеризующую продукцию:
— наименование продукта;
— наименование предприятия-изготовителя или упаковщика, его адрес и товарный знак (если имеется);
— вид, марку, назначение масла (для марки Р с обязательным указанием назначения: «для промышленной рафинации, дезодорации»), а также сорт (при наличии сортовых розничных цен);
— количество единиц потребительской тары в единицах упаковки для фасования масла или массу нетто для нефасованного масла;
— дату розлива (для продукта в потребительской таре);
— дату налива (для продукта в бочках, флягах, цистернах, баках, контейнерах);
— информацию о сертификации;
— обозначение настоящего стандарта.
При упаковывании бутылок с маслом в открытые ящики или термоусадочную пленку дополнительное нанесение маркировки, характеризующей продукцию, не требуется.
4.4.3 Транспортная маркировка по ГОСТ 14192 с нанесением манипуляционных знаков «Беречь от нагрева» и «Беречь от влаги».
4.4.4 При межгосударственных поставках кукурузного масла маркировка должна соответствовать требованиям внешнеторговых организаций с учетом товарной номенклатуры внешнеэкономической деятельности по приложению В.
5 Правила приемки
5.1 Правила приемки — по ГОСТ 5471.
5.2 Контроль за содержанием пестицидов, токсичных элементов, микотоксинов, радионуклидов, афлатоксина B
и микробиологических показателей осуществляется в соответствии с порядком, установленным производителем продукции по согласованию с органами здравоохранения, гарантирующими безопасность продукции.
6 Методы контроля
6.1 Отбор проб — по ГОСТ 5471.
6.2 Подготовка проб для определения токсичных элементов — по ГОСТ 26929.
6.3 Определение прозрачности и запаха — по ГОСТ 5472.
6.4 Определение вкуса — органолептически.
6.5 Определение цветности масла — по ГОСТ 5477.
6.6 Определение кислотного числа — по ГОСТ 5476, ГОСТ Р 52110 и ГОСТ Р 54896.
6.7 Определение массовой доли фосфорсодержащих веществ — по ГОСТ 7824, ГОСТ Р 52676 и ГОСТ Р 54896.
6.8 Определение массовой доли влаги и летучих веществ — по ГОСТ 11812.
6.9 Определение массовой доли нежировых примесей — по ГОСТ 5481.
6.10 Определение мыла по качественной пробе — по ГОСТ 5480.
6.11 Определение температуры вспышки экстракционного масла — по ГОСТ 9287.
6.12 Содержание пестицидов определяют по методам, утвержденным органами здравоохранения.
6.13 Определение перекисного числа — по ГОСТ 26593, ГОСТ Р 51487 и ГОСТ Р 54896.
6.14 Определение ртути — по ГОСТ 26927.
6.15 Определение железа — по ГОСТ 26928.
6.16 Определение мышьяка — по ГОСТ 26930.
6.17 Определение меди — по ГОСТ 26931.
6.18 Определение свинца — по ГОСТ 26932.
6.19 Определение кадмия — по ГОСТ 26933.
6.20 Определение микробиологических показателей по ГОСТ 9225, ГОСТ 26668, ГОСТ 26669, ГОСТ 10444.12 и [2].
6.21 Определение радионуклидов — по [7] и [8].
6.22 Определение афлатоксина B — по ГОСТ 30711 и [9].
6.23 Определение микотоксинов — по приложению Г.
7 Транспортирование и хранение
7.1 Кукурузное масло транспортируют в железнодорожных цистернах с нижним сливом по ГОСТ 10674, в специальных — для перевозки растительных масел — приписных железнодорожных и автоцистернах с плотно закрывающимися люками по ГОСТ 9218 и других транспортных средствах, снабженных трафаретами и надписями в соответствии с правилами перевозок грузов, действующими на соответствующем виде транспорта.
При транспортировании открытым автотранспортом бочки, фляги и ящики с фасованным кукурузным маслом должны быть защищены от атмосферных осадков и от солнечных лучей.
Отгрузку потребительской тары с фасованным маслом в открытых ящиках согласовывают с потребителем.
7.2 Железнодорожные и автоцистерны должны соответствовать требованиям, предъявляемым к перевозке и временному хранению рафинированного дезодорированного масла, они должны быть тщательно зачищены от остатков ранее хранившегося в них масла, пропарены, вымыты и высушены.
Налив рафинированного дезодорированного кукурузного масла в железнодорожные и автоцистерны осуществляют при помощи трубопровода, доходящего до дна цистерны.
Перекачку рафинированного дезодорированного кукурузного масла проводят по коммуникациям, предназначенным для данного вида масла.
7.3 Транспортирование бочек, фляг с маслом, а также ящиков с фасованным кукурузным маслом транспортными пакетами проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 21650, ГОСТ 22477, ГОСТ 23285, ГОСТ 24597 и ГОСТ 26663.
7.4 Кукурузное масло до налива в железнодорожные и автоцистерны, а также во фляги и бочки или до розлива в бутылки хранят в закрытых баках.
Срок транспортирования и хранения рафинированного дезодорированного масла до розлива в бутылки на предприятии, где отсутствует возможность дезодорации масел, а также до использования в производстве продуктов детского и диетического питания — не более одного месяца.
7.5 Кукурузное масло в бутылках хранят в закрытых затемненных помещениях, во флягах и бочках — в закрытых помещениях.
Хранение кукурузного масла в промышленных условиях осуществляют в соответствии с инструкциями по хранению.
8 Гарантии изготовителя
8.1 Изготовитель гарантирует соответствие кукурузного масла требованиям настоящего стандарта при соблюдении условий транспортирования и хранения.
8.2 Срок годности кукурузного масла (со дня выработки) устанавливает изготовитель в зависимости от схемы производства, от температуры хранения, наличия потребительской упаковки и вида упаковочного материала.
ПРИЛОЖЕНИЕ А (справочное). Жирно-кислотный состав кукурузного масла
-Линоленовая
-Линоленовая
Определение жирно-кислотного состава — по ГОСТ 30418.
ПРИЛОЖЕНИЕ Б (справочное). Нормы и методы контроля показателей «Йодное число» и «Массовая доля неомыляемых веществ» в кукурузном масле
ПРИЛОЖЕНИЕ В (справочное). Выписка
ПРИЛОЖЕНИЕ В
(справочное)
из «Товарной номенклатуры внешнеэкономической деятельности содружества независимых государств (ТН ВЭД СНГ) изд. 2-е, М., 1996».
Раздел III
Жиры и масла растительного и животного происхождения; продукты их расщепления; приготовленные пищевые жиры; воски животного или растительного происхождения
Жиры и воски растительного или животного происхождения; продукты их расщепления; приготовленные пищевые жиры; воски животного или растительного происхождения
ПРИЛОЖЕНИЕ Г (обязательное). Определение микотоксинов (по биотесту с инфузориями)
ПРИЛОЖЕНИЕ Г
(обязательное)
Метод предназначен для определения микотоксинов в растительных маслах в условиях заводских лабораторий и при проведении научных исследований.
Метод основан на реакции инфузорий тетрахимена пирифермис на наличие в экстракте из масла токсинов, синтезируемых мицеллиальными грибами при их развитии на используемом сырье.
Г.1 Отбор проб — по ГОСТ 5471.
Г.2 Аппаратура, реактивы, материалы
Весы лабораторные по ГОСТ 24104 3-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 1000 г.
Микроскопы с 7-8-кратным увеличением марок МБР-1, МБИ-1, МБИ-11, МБИ-15 и другие с аналогичными характеристиками.
рН-метры лабораторные (иономеры) с пределом измерений 0-14 единиц рН и ценой деления шкалы 0,05 единиц рН, снабженные стеклянными или хлорсеребряными электродами.
Воронка делительная ВД-1-500 ХС по ГОСТ 25336.
Колбы плоскодонные П-1-250-29/32 ТХС, П-2-250-34 ТХС, П-1-500-29/32 ТХС, П-2-500-34 ТХС, П-1-1000-45/40 ТХС или колбы конические Кн-1-250-24/29 ТХС, Кн-2-250-34 ТХС, Кн-1-500-29/32 ТХС, Кн-1-500-34/35 ТХС, Кн-1-500-45/40 ТХС, Кн-2-500-34 ТХС, Кн-2-500-40 ТХС, Кн-2-500-50 ТХС, Кн 1-1000-45/40 ТХС, Кн-2-1000-42 ТХС по ГОСТ 25336.
Цилиндры мерные 1-2-50, 1-3-50, 1-4-50 и 1-2-250, 1-3-250, 1-4-250 по ГОСТ 1770.
Чашки Петри (биологические) БН-1-100 по ГОСТ 25336.
Пипетки градуированные 1-1-1-1, 1-1-1-2 по ГОСТ 29228.
Пробирки П1-14-120 ХС, П1-16-150 ХС, П2-14-100 ХС, П2-16-150 ХС, П2-16-180 ХС по ГОСТ 25336.
Стекло часовое.
Палочки стеклянные с оплавленными концами длиной 10-15 см, диаметром 0,3-0,5 см.
Автоклав.
Спиртовка.
Спирт этиловый технический по ГОСТ 17299 или спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300, раствор с массовой долей 30%.
Эфир петролейный по нормативному документу [10].
Эфир медицинский [11].
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Пептон по ГОСТ 13805.
Дрожжевой экстракт.
Глюкоза по ГОСТ 6038.
Натрий хлористый по ГОСТ 4233.
Культуру инфузорий тетрахимена пириформис.
Г.3.1 Получение водно-спиртовых экстрактов из масла
В колбе вместимостью 250 см взвешивают около 50 г масла, записывают результат с точностью до второго десятичного знака, добавляют 125 см петролейного эфира, перемешивают и раствор сливают в делительную воронку. Затем в колбу приливают 50 см раствора этилового спирта и проводят экстракцию встряхиванием. После разделения слоев водно-спиртовой экстракт сливают в колбу вместимостью 250 см, к раствору масла в делительной воронке вновь добавляют 50 см раствора этилового спирта и экстракцию повторяют. Операцию экстракции проводят пять раз. Экстракты объединяют и определяют объем. Соотношение (навеска : раствор этилового спирта) должно составлять 1:5.
Г.3.2 Приготовление пептонной среды
Пептонную среду для выращивания инфузорий (рН 7.1) готовят по следующей рецептуре:
Стерилизацию воды и среды проводят в течение 20 мин при давлении 0,06 мПа (0,6 атм.) в автоклаве.
Г.3.3 Поддержание жизнедеятельности культуры инфузорий тетрахимена пириформис
Для поддержания жизнедеятельности культуры инфузорий ежемесячно пересевают на свежую пептонную среду. Пересев осуществляют в стерильных условиях.
В стеклянную пробирку, края которой стерилизуют непосредственно перед посевом в пламени спиртовки, приливают 4 см пептонной среды, приготовленной, как указано в 3.2, и вносят 0,2 см культуры инфузорий стерильной пипеткой. Пипетку предварительно обжигают в пламени спиртовки, не допуская ее нагрева, так как инфузории очень чувствительны к температуре и гибнут при температуре выше 28 °С.
Пробирку закрывают стерильной пробкой над пламенем спиртовки и хранят при температуре (20±2) °С в темноте.
На часовое стекло пипеткой наносят 0,04 см приготовленного водно-спиртового экстракта масла и после полного испарения водно-спиртового раствора на то же место наносят 0,04 см стерильной воды. Оставшиеся на часовом стекле после испарения водного раствора спирта вещества тщательно растирают с водой оплавленным концом стеклянной палочки, в полученную среду вносят 0,02 см культуры инфузорий. Количество особей должно составлять около 8х10
в 1 см.
Часовое стекло с инфузориями помещают на предметный столик микроскопа и ведут наблюдения при 7-8-кратном увеличении микроскопа в течение суток, отмечая поведение инфузорий через 3 и 20 мин, через 2 и 24 ч.
В промежутках между наблюдениями часовое стекло с инфузориями помещают в чашку Петри с фильтровальной бумагой, смоченной водой, и хранят при температуре (20±2) °С.
При наблюдении отмечают появление различных дегенеративных форм (особей с несколькими выпячиваниями протоплазмы, возникновение кеглеобразных и шарообразных клеток и вытекание протоплазмы) и изменение характера движения.
Г.5 Обработка результатов
При наличии микотоксинов инфузории вначале начинают двигаться зигзагообразно, затем по кругу, постепенно их движение замедляется, затем они останавливаются, изменяется форма клетки и наступает ее распад.
Отсутствие микотоксинов в пробе устанавливают по сохранению жизнедеятельности всех инфузорий через 24 ч.
Для сравнения проводят контрольную пробу: на часовое стекло наносят 0,04 см водного раствора этилового спирта. После его испарения наносят капельку воды с культурой инфузорий. Дальнейшее определение ведут по Г.4.
